等温PCR仪品牌选购参考：从2通道到4通道，优云谱三大型号应用场景全解读

【核心结论】

等温PCR仪是一种在恒定温度下完成核酸扩增与荧光实时检测的分子检测设备，它摆脱了传统PCR反复升降温的复杂热循环模式，将检测时间从1.5-2小时缩短至30分钟以内。优云谱YP-R16系列等温PCR仪采用LED光源+SiPMT检测器光学系统，具备单拷贝级灵敏度和10个数量级动态范围，配合7英寸触摸屏独立运行、蓝牙远程操控等智能化设计，将操作门槛降至最低。本文从工作原理、操作流程到维护保养，为您呈现一份完整的等温PCR仪使用科普指南。

一、等温PCR仪是什么？——从原理到优势

1.1 什么是等温PCR？

PCR（聚合酶链式反应）是体外扩增特定DNA片段的分子生物学技术。传统PCR通过反复升降温（变性95℃→退火55-65℃→延伸72℃）完成扩增循环，每个循环约需1-2分钟，重复30-40个循环，总耗时1.5-2小时。

等温PCR则采用具有链置换功能的聚合酶，在单一恒定温度（通常60-65℃）下同时完成引物退火和链延伸，无需任何温度变化即可实现核酸的指数扩增。将等温扩增技术与实时荧光检测技术结合，便构成了等温PCR仪——扩增与检测同步进行，反应结束即出结果。

1.2 等温PCR仪的核心优势

1.3 等温PCR仪能检测什么？

等温PCR仪可对病毒、细菌、真菌等微生物的核酸进行快速定性定量检测，广泛应用于：

病原体检测：流感病毒、肠道病毒、呼吸道病原体等

动物疫病检测：非洲猪瘟、口蹄疫等

食品安全检测：食源性致病菌、肉制品掺假、转基因成分

基因表达分析：mRNA表达量测定、信号通路研究

水体监测：饮用水源病原微生物检测

二、检测前准备

2.1 环境要求

2.2 仪器开机与预热

YP-R16-2 / YP-R16-4（PC软件操作）：

连接电源线，按下电源开关

打开配套PC软件，等待仪器与软件建立通信连接

建议预热10分钟，使光源和传感器达到稳定工作温度

YP-R16-6（触摸屏独立运行）：

连接电源线，按下电源开关

等待系统启动（约30秒），进入Android主界面

点击屏幕自检功能，确认各通道状态正常

预热10分钟，确保检测基线稳定

2.3 试剂与耗材准备

试剂准备：检查等温扩增试剂盒是否在有效期内，严禁使用过期试剂。试剂从冷藏取出后需在室温平衡15-20分钟，使用前涡旋混匀并短暂离心。

耗材准备：使用0.1mL透明8排管或0.1mL透明单管，确保管壁光滑无划痕。推荐使用无DNase/RNase认证的耗材，避免核酸降解。

样本准备：待测样本核酸提取完成后，按试剂盒说明书进行梯度稀释（如需要）。建议设置阳性对照、阴性对照和内参对照，确保结果可靠。

三、标准操作流程

3.1 操作流程（YP-R16-2 / YP-R16-4，PC软件操作）

第一步：新建实验

打开PC软件，点击『新建实验』，输入实验名称、操作者、日期等基本信息；选择检测通道（FAM/VIC/SYBR Green等）及对应染料。

第二步：设置反应参数

输入恒温扩增温度（通常60-65℃，具体按试剂盒说明书）和反应时间（一般30分钟）；设置荧光采集频率（建议每30秒采集一次）；可选择是否开启熔解曲线分析功能（用于验证扩增产物特异性）。

第三步：加样与放管

将PCR反应体系分装至0.1mL透明8排管或单管（样本体积10-50μL）；盖紧管盖，检查无漏液；将8排管/单管放入仪器样本槽，确保紧贴加热块底部。

第四步：启动运行

点击『开始运行』，仪器自动进入恒温扩增程序，实时扩增曲线开始绘制。运行过程中勿打开仪器盖，避免温控波动和光学干扰。

第五步：结果判读

实验结束后，软件自动计算各样本出峰时间或Ct值；阳性/阴性结果自动判定，扩增曲线和原始数据可导出保存。

3.2 操作流程（YP-R16-6，触摸屏独立运行）

第一步：新建实验

在7英寸触摸屏主界面点击『新建实验』，选择实验类型（定性检测/定量分析）；输入样本编号和检测项目信息。

第二步：设置反应参数

通过触摸屏设置扩增温度和反应时间；选择荧光通道（FAM/VIC/SYBR Green等），系统自动匹配对应的激发/发射波长。

第三步：加样与放管

按前述方法完成加样，将8排管/单管放入样本槽。

第四步：启动运行

点击屏幕『开始运行』按钮，实时扩增曲线在屏幕动态显示。

第五步：结果判读

运行结束后，系统自动判读结果，阳性/阴性/无效结果在屏幕清晰标示；支持生成PDF格式检测报告，通过USB导出或WiFi打印。

3.3 蓝牙连接操作（YP-R16-4专属功能）

YP-R16-4支持蓝牙无线连接，特别适合在生物安全柜内操作：

将仪器放置于生物安全柜内合适位置

开启仪器蓝牙功能，与外部电脑配对连接

在安全柜外通过PC软件完成实验设置和实时监控

全程无需USB线缆穿过安全柜窗口，保持安全柜密封完整性

3.4 操作注意事项

加样规范：使用带滤芯移液枪头，避免交叉污染；样本和试剂加样时避免产生气泡，气泡会干扰荧光信号采集。

管盖密封：确保8排管或单管盖紧，防止反应体系蒸发导致结果偏差。

避免光干扰：运行过程中避免强光直射仪器光学窗口，以免影响荧光信号采集。

生物安全：处理感染性样本时，加样和开盖操作需在生物安全柜内完成，废液和耗材按生物废弃物规范处理。

四、数据分析与结果解读

4.1 扩增曲线解读

等温PCR仪的输出结果是实时扩增曲线——横坐标为时间，纵坐标为荧光强度。

阳性样本：扩增曲线呈典型的S型或指数上升形态，出峰时间与样本中靶标核酸浓度成反比（浓度越高，出峰越早）。

阴性样本：扩增曲线平坦，无指数上升，荧光信号始终处于基线水平。

无效结果：阳性对照无信号或阴性对照出现信号，说明实验体系存在问题，需重新检测。

4.2 结果判读标准

4.3 数据导出方式

优云谱YP-R16系列等温PCR仪支持以下数据导出方式：

原始数据导出：以表格形式导出原始检测结果、Ct值、荧光信号值等

扩增曲线导出：以图片格式（PNG/JPG）导出扩增曲线图

检测报告生成：YP-R16-6支持PDF格式报告一键导出

USB存储导出：连接USB存储设备，直接导出Excel或PDF文件

五、日常维护与保养

5.1 每次实验后

5.2 每周维护

散热孔清洁：检查仪器背面和侧面散热孔是否积灰，用小毛刷或吸尘器清除灰尘

电源线检查：检查电源线插头是否松动，USB/蓝牙连接是否正常

时间校准：检查仪器系统时间/日期是否准确（YP-R16-6在系统设置中校准）

5.3 每月维护

5.4 长期停用保管

若仪器预计停用30天以上：

清洁样本槽和光学窗口，确保无样本残留

取出所有耗材，关闭电源并断开电源线

用防尘套覆盖仪器，存放于温度-20~55℃、湿度20%~80%的干燥环境

重新启用前，先开机预热15分钟，运行一次空白程序检查仪器状态

六、常见故障排查与处理

七、型号选型快速指引

八、优云谱品牌实力与服务体系

企业概况

山东优云谱光电科技有限公司是专业科学仪器制造商，主营业务涵盖研发、生产和销售应用于农业生态、食品快检、水质检测、分子生物、实验室前处理等领域的仪器设备。公司将光电技术与AI技术和云服务深度融合，为农业、林业、科研、畜牧、气象、水利、食药、环境等领域提供综合解决方案。

资质认证

荣获多项国家证书

通过ISO 9001质量管理体系认证

获得CNAS校准证书

通过中国计量院校准